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APO-DIRECT™ Kit – Kit

La fragmentación del ADN genómico por las nucleasas celulares durante las últimas etapas de la apoptosis es también una de las características más fáciles de medir de las células apoptóticas. La actividad de la nucleasa genera fragmentos de ADN que van desde ~300 pb a 50 pb de longitud, lo que da como resultado una apariencia típica de «escalera» de ADN cuando se analiza mediante electroforesis en gel de agarosa. Estos fragmentos tienen extremos expuestos de 3′-hidroxilo (OH) que pueden marcarse con trifosfatos de desoxiuridina (dUTP). Se utiliza una enzima, la desoxinucleotidil transferasa terminal (TdT), para catalizar la adición independiente de la plantilla de dUTP marcada con fluorescencia a los extremos 3′-OH del ADN bicatenario o monocatenario. Este método a menudo se denomina TUNEL (deoxinucleotidil transferasa terminal dUTP nick end labeling) o etiquetado final.

Con el kit APO-DIRECT™, las células se tiñen con dUTP marcado con FITC en un solo paso. A continuación, las muestras se pueden analizar mediante citometría de flujo. Las muestras que son apoptóticas se tiñirán brillantemente debido al número sustancial de sitios 3′-OH expuestos, mientras que las células que no son apoptóticas no habrán incorporado cantidades significativas de FITC-dUTP y se tiñirán tenuemente.

El kit APO-DIRECT se envía en un contenedor y consta de dos paquetes más un manual de instrucciones. A su llegada, uno debe almacenarse a 2-8 °C y el otro a -20 °C.

 

Citas recientes:

Lee KS, Lee J, Lee P, Jeon BC, Song MY, Kwak S, Lee J, Kim JS, Kim DJ, Kim JH, Tesh VL, Lee MS, Park SK. La inhibición de la O-GlcNAcilación protege de la lesión celular mediada por la toxina Shiga y la letalidad en el huésped. EMBO Mol Med. 11 de enero de 2022; 14(1):E14678. doi: 10.15252/emmm.202114678. Epub 29 de noviembre de 2021. PMID: 34842355; PMCID: PMC8749473.

» Ver en PubMed (en inglés)

Nombre Kit APO-DIRECT™
Hojas de Datos TDS | SDS
Clon N/A
Isotipo N/A
Formato FITC
Aplicación Citometría de flujo
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