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APO-BrdU™ Kit – Kit

La fragmentación del ADN genómico por las nucleasas celulares durante las últimas etapas de la apoptosis es también una de las características más fáciles de medir de las células apoptóticas. La actividad de la nucleasa genera fragmentos de ADN que van desde ~300 pb a 50 pb de longitud, lo que da como resultado una apariencia típica de «escalera» de ADN cuando se analiza mediante electroforesis en gel de agarosa. Estos fragmentos tienen extremos expuestos de 3′-hidroxilo (OH) que pueden marcarse con trifosfatos de desoxiuridina bromolados (Br-dUTP). Se utiliza una enzima, la desoxinucleotidil transferasa terminal (TdT), para catalizar la adición independiente de la plantilla de Br-dUTP a los extremos 3′-OH del ADN bicatenario o monocatenario. Este método a menudo se denomina TUNEL (deoxinucleotidil transferasa terminal dUTP nick end labeling) o etiquetado final. Los sitios donde se incorpora el Br-dUTP pueden detectarse con un anticuerpo específico para BrdU.

Con el kit APO-BrdU™, las células se marcan primero con Br-dUTP y, a continuación, se detectan los sitios de incorporación mediante tinción con un anticuerpo anti-BrdU FITC. A continuación, las muestras se pueden analizar mediante citometría de flujo. Las muestras que son apoptóticas se tiñirán brillantemente con el anticuerpo anti-BrdU debido al número sustancial de sitios 3′-OH expuestos, mientras que las células que no son apoptóticas no habrán incorporado cantidades significativas de Br-dUTP y se tiñirán tenuemente.

El kit APO-BrdU se envía en un contenedor y consta de dos paquetes más un manual de instrucciones. A su llegada, uno debe almacenarse a 2-8 °C y el otro a -20 °C.

Nombre Kit APO-BrdU™
Hojas de Datos TDS | SDS
Clon PRB-1
Isotipo Ratón IgG1, kappa
Formato FITC
Aplicación Citometría de flujo
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